Выделение и свойства НАД-киназы из сердца голубя

  • автор:
  • специальность ВАК РФ: 03.00.00
  • научная степень: Кандидатская
  • год, место защиты: 1984, Москва
  • количество страниц: 152 c. : ил
  • автореферат: нет
  • стоимость: 240,00 руб.
  • нашли дешевле: сделаем скидку
  • формат: PDF + TXT (текстовый слой)
pdftxt

действует скидка от количества
2 диссертации по 223 руб.
3, 4 диссертации по 216 руб.
5, 6 диссертаций по 204 руб.
7 и более диссертаций по 192 руб.
Титульный лист Выделение и свойства НАД-киназы из сердца голубя
Оглавление Выделение и свойства НАД-киназы из сердца голубя
Содержание Выделение и свойства НАД-киназы из сердца голубя
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. Основные направления изучения НАД-киназы
1.1. Распространение и внутриклеточная локализация
НАД-кинабы
1.2. Субстратная специфичность НАД-киназы
1.3. Четвертичная структура НАД-киназы
1.4. Активность НАД-киназы
1.5. О механизме действия НАД-киназы
1.6. Регуляция активности НАД-киназы
ГЛАВА 2. Регуляторное значение изменения четвертичной
структуры
ГЛАВА 3. Регуляция активности ферментов при помощи
высокомолекулярных факторов
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
I. Методы исследования
1. Реактивы
2. Выделение НАД-киназы
3. Определение активности НАД-киназы
4. Исследование препаратов НАД-киназы методами электрофореза (ЭФ)
4.1. Диск ЭФ
4.2. ЭФ в градиенте концентрации НААГ
4.3. Определение молекулярного веса исследуемых белков
4.4. ЭФ в присутствии 31,3
4.5. Окрашивание белковых зон в столбиках геля
4.6. Определение локализации НАД-кинаэы в столбиках геля
5. Гель-фильтрация НАД-киназы
6. Иммобилизация НАД-киназы на одифиле
6.1. Активация одифила
6.2. Определение диазогрупп в активированном одифиде
6.3. Иммобилизация НАД-киназы
6.4. Определение активности иммобилизованной НАД-киназы
7. Определение белка
8. Концентрирование растворов белка
9. Определение НАД, НАДФ, АТФ
П. Результаты и их обсуждение
1. Разработка метода получения препаратов НАД-кина8ы из сердца голубя
2. Изучение четвертичной структуры НАД-киназы
из сердца голубя
2.1. Электрофоретически гомогенный препарат НАД-киназы
2.2. Субъединица НАД-киназы из сердца
голубя
2.3. Электрофоретический анализ частично очищенных препаратов НАД-киназы.
Повторный ЭФ
2.4. Гель-фильтрация частично очищенных препаратов НАД-киназы
2.5. Взаимный переход форм НАД-киназы
3. Сравнение кинетических свойств частично
очищенных и электрофоретически гомогенных
препаратов НАД-кинагы
3.1. Изучение зависимости О. от [Е]
3.2. Зависимость іг от ІД]с для частично очищенных препаратов НАД-киназы
3.3. Зависимость іг от [SJC для электрофоре тичеоки гомогенного фермента
3.4. Типы взаимных переходов между МИФ НАД-киназы
3.5. Колебания активности НАД-киназы при хранении
4. Активатор НАД-киназы
5. Иммобилизация НАД-киназы и доказательство
активности мономера
5.1. Подбор условий иммобилизации НАД-киназы на одифиле
5.2. Иммобилизация мономера НАД-киназы ... II?
5.3. Влияние иммобилизации на сохранность активности НАД-киназы
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ...13,0
а х <1
ИГ в , где
Ь х с
а - длина геля до окраски;
ъ - длина геля после окраски;
с - положение краски-маркера;
а - положение белковой полосы.
Таблица I
Состав и количество растворов для приготовления линейного градиента концентрации полиакриламидного геля
Компоненты 3% гель 20% гель
Гелевый буфер
1,75 М трис-НС1 pH 8,9 е 12 мл 12 мл
(21,2 г трис на 100 мл раствора)
Цианогам 42%
(2,1 г метиленбисакриламида + 39Д ггакриламида на 100 мл раствора) 4,25 мл ! 28,% мл
50% сахароза - 12 мл
ТЕМЕД 0,07 мл 0,025 мл
Вода 37,7 мл 1,475 мл
Персульфат аммония 0,65% 6 мл 6 мл
Общий объем 60 мл 60 мл
Компоненты смешивали в хорошо охлажденной колбе, стоящей на льду, в указанном порядке. Расчет дан на 12-14 трубочек.
Калибровочный график строили при каждом электрофоретическом разделении белков (рис.2).
В качестве стандартов использовали следующие белковые препа-
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления

Рекомендуемые диссертации данного раздела