Изучение активного центра мышечной гликогенсинтазы I

  • автор:
  • специальность ВАК РФ: 03.00.00
  • научная степень: Кандидатская
  • год, место защиты: 1984, Москва
  • количество страниц: 119 c. : ил
  • автореферат: нет
  • стоимость: 240,00 руб.
  • нашли дешевле: сделаем скидку
  • формат: PDF + TXT (текстовый слой)
pdftxt

действует скидка от количества
2 диссертации по 223 руб.
3, 4 диссертации по 216 руб.
5, 6 диссертаций по 204 руб.
7 и более диссертаций по 192 руб.
Титульный лист Изучение активного центра мышечной гликогенсинтазы I
Оглавление Изучение активного центра мышечной гликогенсинтазы I
Содержание Изучение активного центра мышечной гликогенсинтазы I
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления
ОБВОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. АМИНОКИСЛОТНЫЙ СОСТАВ, МОЛЕКУЛЯРНАЯ МАССА И ОЛИГОМЕРНОЕ СОСТОЯНИЕ ГЛИКОГЕНСИНТАЗЫ
а) Аминокислотный состав
б) Молекулярная масса и олигомерное состояние
Глава II. ПУТИ РЕГУЛЯЦИИ АКТИВНОСТИ ГЛИКОГЕНСИНТАЗЫ
1. Фосфорилирование - дефосфорилирование
2. Аллостерическая регуляция
Глава III. ХАРАКТЕРИСТИКА ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ГРУШ
ГЛАВА ГУ . МЕХАНИЗМ ДЕЙСТВИЯ ГЛИКОГЕНСИНТАЗЫ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛШАЯ ЧАСТЬ. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Г. Выделение гликогенсинтазы I из скелетных мышц
кролика
2. Диск-электрофорез в 7,5$ полиакриламидном
геле в присутствии ДСН
3. Методы определения белка
4. Титрование сульфгидрильных групп
5. Выделение гликогена
6. Метод определения активности гликогенсинтазы Г
7. Модификация гликогенсинтазы Г карбодиимидами
8. Модификация гликогенсинтазы I п-ФСБУ, м-ФСБУ, п-БМБУ
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Г. Выделение гликогенсинтазы Г в комплексе с
гликогеном
2. Изучение действия урадила, уридина, глюкозы и 1,5-глюконолактона на активность гликогенсинтазы I
3. Модификация гликогенсинтазы I карбодиимида-
4. Определение рКа модифицируемой ЭДК карбоксильной группы
5. Влияние нуклеофилов на модификацию гликогенсинтазы I ЭДК
6. Аффинная модификация гликогенсинтазы I
7. БН - группа активного центра гликогенсинтазы. I .
Заключение
Выводы
Список цитируемой литературы
ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
АТР - аденозинтрифосфат
АТРаза - адено зинтрифосфатаза
сАМР - циклический аденозинмонофосфат
ДВН - додецилсульфат натрия
ДШБ - 5,5’-дитиобис-(2-нитробензоат)
ДЭАЭ- целлюлоза - диэтиламиноэтилцеллюяоза
ДЦКД - л, N -дициклогексилкарбодиимид
ЕбТА - этиленгликольтетраацетат
^ - 2-морфолиноэтансульфоновая кислота
НЕРЕБ _ и -2-оксиэтилпиперазин
МЭ - £ -меркаптоэтанол
НАДН - никотинамидаденинуклеотид восстановленный
рмбр - фенилметилсульфанилфторид
ПААТ - полиакриламидный гель
- неорганический фосфат
ФЕИ - фосфоенолпируват
п-ФСБУ - 5,-(п-фторсульфонилбензоил)уридин
м-ФСБУ - 5’- (м-фторсульфонилбензоил)уридин
д-ЕМБУ - 5’-(п-бромметилбензоил)уридин
ЦМКД - N - циклогексил - N (ы - метилморфолиний) этил
карбодиимида толуол сульфонат Трис - триоксиметиламинометан
ТХУ - трихлоруксусная кислота
тар - уридиндифосфат
1ГОРб - уридиндифосфатглюкоза
иМР - уридинмонофосфат
итр - уридинтрифосфат
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
ЭДК _ К _ этил- н'-СЗ-диметиламинопропил) карбодиимида
гидрохлорид.
Продолжение таблицы 3.
pH ! ЭДК, мМ ! Реактивация в %
7,0 0,5
7,0 2,
7,0 3
7,0 5
Из таблицы 3 видно, что увеличение pH модификации оказывает незначительное влияние на степень реактивации, но она резко снижается с увеличением концентрации ЭДК. Однако в диапазоне концентраций ЭДК, в котором мы работали, реактивация была практически полной.
Полученные данные подтверждают специфичность модификации карбодиимидом карбоксильных групп. Кроме того, мы провели анализ модифицированного при различных значениях pH фермента в полиакриламидном геле в присутствии ДСН. На столбике геля присутствовала одна полоса с молекулярным весом 85 ООО, характеризующая субъединицу гликогенсинтазы.
Как известно, одним из доказательств специфического связывания ингибитора в активном центре фермента является защитное действие субстрата или продукта реакции. Мы использовали в опытах по защите от инактивации гликогенсинтазы I под действием ЭДК обратимый конкурентный ингибитор фермента, продукт - пор, а также аналог переходного состояния - 1,5-глюко-нолактон. Защита была эффективна при всех исследованных
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления

Рекомендуемые диссертации данного раздела