Дитерпеновые гликозиды в интактных растениях и культурах in vitro стевии (Stevia rebaudiana Bertoni)

  • Автор:
  • Специальность ВАК РФ: 03.01.05
  • Научная степень: Докторская
  • Год защиты: 2011
  • Место защиты: Орел
  • Количество страниц: 275 с. : ил.
  • бесплатно скачать автореферат
  • Стоимость: 230 руб.
Титульный лист Дитерпеновые гликозиды в интактных растениях и культурах in vitro стевии (Stevia rebaudiana Bertoni)
Оглавление Дитерпеновые гликозиды в интактных растениях и культурах in vitro стевии (Stevia rebaudiana Bertoni)
Содержание Дитерпеновые гликозиды в интактных растениях и культурах in vitro стевии (Stevia rebaudiana Bertoni)

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Дитерпеноиды как одна из важнейших групп изопреноидов (терпеноидов) растений: классификация, строение, биосинтез, функции..
1.2 Особенности и регуляция процессов роста и биосинтеза соединений специализированного обмена в культурах клеток растений
1.3 Ультраструктура терпеноидпродуцирующих клеток растений
1.4 Полиплоидия как способ увеличения продуктивности растений
1.5 Культуры стевии in vitro как модельные системы для изучения закономерностей образования дитерпеноидов
1.6 Характеристики объектов исследования и синтезируемых ими соединений - дитерпеновых гликозидов
1.6.1 Характеристика растений Stevici rebaudiana Bertoni
1.6.1.1 Систематика, морфология, экология, ареал
1.6.1.2 Особенности размножения и выращивания растений
1.6.1.3 Состав, содержание и распределение дитерпеновых гликозидов в растении
1.6.1.4 Другие соединения специализированного обмена стевии..
1.6.1.5 Особенности анатомического строения листа стевии
1.6.1.6 Влияние внешних факторов на развитие растений и накопление дитерпеновых гликозидов
1.6.2 Характеристика дитерпеновых гликозидов
1.6.2.1 Строение и свойства дитерпеновых гликозидов
1.6.2.2 Биосинтез дитерпеновых гликозидов в клетке
1.6.2.3 Распространение, функции и биологическая активность дитерпеновых гликозидов
1.6.2.4 Методы анализа дитерпеновых гликозидов

1.6.3 Культуры клеток и тканей стевии
1.6.3.1 Получение
1.6.3.2 Биосинтез дитерпеновых гликозидов
Глава 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1 Объекты исследования
2.1.1 Интактные растения стевии и их выращивание
2.1.2 Получение стерильных растений и культивирование их in vitro..
2.1.3 Индукция каллусогенеза, получение и выращивание каллусных и суспензионных культур
2.2 Методы исследования
2.2.1 Изучение особенностей роста культур in vitro
2.2.2 Исследование ультраструктуры тканей и клеток
2.2.2.1 Цитолого-анатомнческий анализ
22.2.2 Цитофотометрия
2.2.2.3 Сканирующая электронная микроскопия
2.2.2.4 Трансмиссионная электронная микроскопия
2.2.3 Выделение хлоропластов и определение фотосинтетических
характеристик растений и культур клеток
2.2.4 Экстракция, очистка и анализ дитерпеновых гликозидов
в растительном материале
2.2.5 Особенности проведения ТСХ и ВЭЖХ и сравнение результатов анализа дитерпеновых гликозидов
2.2.5.1 ТСХ
2.2.5.2 ВЭЖХ
2.2.5.3 Оценка воспроизводимости и сопоставление результатов анализа ДГ, полученных методами ТСХ и ВЭЖХ
2.2.6 Идентификация ДГ и их предшественников

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Глава 3. СОСТАВ, СОДЕРЖАНИЕ И РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ДИТЕРПЕНОВЫХ ГЛИКОЗИДОВ В ИНТАКТНЫХ И IN VITRO РАСТЕНИЯХ
3.1 Особенности роста растений и аккумуляции в них дитерпеновых гликозидов в зависимости от морфогенетических особенностей генотипа и условий выращивания............................... ..'
3.1.1 Интактные растения
3.1.2 Растения in vitro
3.2 Распределение дитерпеновых гликозидов в различных органах интактных растений
3.3 Ярусность распределения дитерпеновых гликозидов в надземных вегетативных органах
3.4 Динамика содержания дитерпеновых гликозидов в вегетативных
органах в течение онтогенеза
Обсуждение
Глава 4. БИОСИНТЕЗ И НАКОПЛЕНИЕ ДИТЕРПЕНОВЫХ ГЛИКОЗИДОВ В КЛЕТКАХ И ИХ ПРОЛИФЕРАЦИЯ ПРИ ПОВЕРХНОСТНОМ И ГЛУБИННОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ
4.1 Получение первичных каллусных тканей различного генотипического и эпигенетического происхождения. ;
4.2 Влияние происхождения экспланта и регуляторов роста на каллусогенез и пролиферацию клеток
4.3 Морфогенез в культуре эксплантов и каллусной культуре
4.4 Морфофизиологическая характеристика каллусных и суспензионных культур клеток различного происхождения
4.4.1 Каллусные культуры
4.4.2 Суспензионные культуры
4.5 Состав и содержание дитерпеновых гликозидов в культуре клеток

Влияние физических факторов
pH среды. Для роста культивируемых клеток растений, как правило, предпочтительным является диапазон pH среды в пределах 5.0-6.5 [Rokem, Goldberg, 1985]. Культивируемые клетки при выращивании могут изменять pH в некотором интервале до оптимума [Константинова, Александрова, 1979; Каухова и др., 1981]. Максимальные ростовые показатели соответствуют, как правило, узкому диапазону pH.
pH оказывает значительное влияние и на содержание вторичных соединений. Однако, таких данных немного. Например, известно, что клетках моркови при pH 5,5 содержалось меньше антоцианов, чем при pH
4,5 [Dougall et al., 1983]. Изменение pH от 4,2 до 8,6 (контроль рН=7,2) в суспензионной культуре мака прицветникового при короткой (1,5 часа) экспозиции вызвало увеличение содержания в клетках обеих форм сангвинарина примерно в 1,5 раза, причем увеличивалось соотношение дигидросангвинарина к его окисленной форме - сангвинарину [Рабинович, Кузовкина, 1991].
Свет. Изучению действия этого фактора на образование вторичных метаболитов посвящено наибольшее количество работ. Было изучено как влияние света разного качественного состава, так и его интенсивности, а также режима освещения. Было показано, что каллусные и суспензионные культуры Crataegus monogyna, Crataegus oxyacantha и Ginkgo biloba синтезировали проантоцианидины и катехины только при культивировании на свету [Schrall and Becker, 1977]. Синий свет стимулировал образование антоцианов в каллусной ткани Haplopappus gracilus [Reinert et al., 1964] и повышал активность ФАЛ в культуре клеток Comhrena globosa [Castaneda, Quintero, 1991]. В длительно выращиваемом на свету каллусе чайного растения значительно повышалось содержание

Рекомендуемые диссертации данного раздела