Антигенные и иммуногенные свойства штаммов вируса болезни Марека при создании эффективных экспериментальных и производственных вакцин

  • автор:
  • специальность ВАК РФ: 03.00.23
  • научная степень: Докторская
  • год, место защиты: 2005, Щёлково
  • количество страниц: 416 с. : ил.
  • бесплатно скачать автореферат
  • стоимость: 240,00 руб.
  • нашли дешевле: сделаем скидку
  • формат: PDF + TXT (текстовый слой)
pdftxt

действует скидка от количества
2 диссертации по 223 руб.
3, 4 диссертации по 216 руб.
5, 6 диссертаций по 204 руб.
7 и более диссертаций по 192 руб.
Титульный лист Антигенные и иммуногенные свойства штаммов вируса болезни Марека при создании эффективных экспериментальных и производственных вакцин
Оглавление Антигенные и иммуногенные свойства штаммов вируса болезни Марека при создании эффективных экспериментальных и производственных вакцин
Содержание Антигенные и иммуногенные свойства штаммов вируса болезни Марека при создании эффективных экспериментальных и производственных вакцин
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления
1. Введение
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
‘ 2.1 БОЛЕЗНЬ МАРЕКА
2.1.2. Классификация ВБМ
2.1.2.1. Вирусы 1 серотипа
2.1.2.2. Вирусы 2 серотипа
2.1.2.3. Вирусы 3 серотипа
2.2. МОРФОЛОГИЯ И МОРФОГЕНЕЗ
2.3. БИОЛОГИЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ВБМ, ВГК И ВГИ
2.3.1. Патогенез и типы взаимодействия вируса с клеткой
2.3.2. Культивирование
2.3.3. Вирусные ДНК
2.3.4. Локализация генов
2.3.5. Различия и сходства между серотипами
2.4. СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА БОЛЕЗНИ МА
РЕКА РАЗЛИЧНЫМИ ТИПАМИ ВАКЦИН
2.4.1. Вакцины на основе штаммов ВБМ серотипа 1
2.4.1.1. Вакцины на основе аттенуированных вирулентных штам
мов ВБМ
2.4.1.2. Вакцины на основе аттенуированных умеренно ви- 47 ^ рулентных штаммов ВБМ
2.4.1.3. Вакцины на основе особо вирулентных штаммов ВБМ
2.4.2. Вакцины на основе штаммов ВБМ серотипа 2
2.4.3. Вакцины на основе штаммов ВБМ серотипа 3
2.4.4. Поливалентные вакцины
2.4.5. Рекомбинантные вакцины
2.4.6. Инактивированные вакцины
2.4.7. Сравнительная эффективность применяемых вакцин
'0 2.4.8. Причины неэффективности вакцинации и способы их уст
ранения
2.5. АНТИГЕНЫ ВБМ
2.5.1. Антиген А
2.5.2. Антиген В
2.5.3. Антиген С
2.5.4. Антиген V
^ 2.5.5. Другие антигены и белковые комплексы, обнаруженные
^ в составе ВБМ, ВГК и ВГИ
'' 2.6. МЕХАНИЗМ ИММУНИТЕТА И ИММУННЫЕ РЕАК
ЦИИ В ОРГАНИЗМЕ ЦЫПЛЯТ, ИНФИЦИРОВАННЫХ
-1^ 4^
РАЗЛИЧНЫМИ СЕРОТИПАМИ ВБМ . 2.6.1. Персистенция вируса болезни Марека
2.6.2. Патогенез
2.6.3. Генетическая резистентность
2.6.3.1. Пассивно приобретенная резистентность к БМ
2.6.3.2. Активно приобретенная резистентность к БМ
■# 2.6.4. Поликлональные антитела, обеспечивающие резистент
ность к болезни Марека
2.6.5. Моноклональные антитела к антигенам ВБМ, обладающие 81 высокой специфичностью
2.6.5.1. Получение гибридом, синтезирующих МАТ
2.6.5.2. Применение МАТ для изучения структуры и функций ан- 82 тигенов ВБМ 1, 2 и 3 серотипов
2.6.6. Антиидиотипические антитела, участвующие в иммунных 85 реакциях организма
* 2.6.6.1. Идиотипический каскад и внутренний образ антигена
2.6.6.2. Антиидиотипические антитела — вакцинные препараты но- 87 вого поколения
2.7. СПОСОБЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕННОЙ И ИММУ- 89 НОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ВБМ, ВГК и ВГИ
2.7.1. Серологические методы, широко применяемые для инди
кации антигенов ВБМ и антител к ним
2.7.2. Особенности получения компонентов ИФА для индикации
антигенов ВБМ и антител к нему
2.7.3. Применение ИФА для индикации антигенов ВБМ, ВГК и
ВГИ и антител к ним
2.8. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ PEAK- 101 ЦИИ ДЛЯ ТИПИРОВАНИЯ ВИРУСА БОЛЕЗНИ МАРЕКА
2.9. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
РЕЗУЛЬТАТЫ ИСЛЕДОВАНИЙ
. 1. ТЕСТ-СИСТЕМА ИФА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КАЧЕСТ
ВА ВАКЦИННЫХ ПРЕПАРАТОВ ПРОТИВ БОЛЕЗНИ
МАРЕКА
4.1.1. Разработка способов выделения антител из желтков яиц
кур для получения антивидовых иммуноферментных конъюгатов
4.1.2. СИНТЕЗ ИММУНОПЕРОКСИДАЗНОГО КОНЪЮГАТА
ф 4.1.2.1. Гипериммунизация животных препаратом IgG
4.1.2.2. Определение специфической активности и чистоты гипе- 132 риммунных сывороток к IgG кур
4.1.2.3. Выделение из гипериммунной сыворотки животных спе
цифических антивидовых антител к желтка яиц кур методом аффинной хроматографии
4.1.2.4. Конъюгация антивидовых антител (анти-^О кур) с перок- 134 сидазой
4.1.3. ОПТИМИЗАЦИЯ УСЛОВИЙ ПОСТАНОВКИ ИФА ДЛЯ 137 ОЦЕНКИ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ВАКЦИН * НА ОСНОВЕ ВГИ ПРОТИВ БОЛЕЗНИ МАРЕКА
4.1.3.1. Полиморфизм вирионов ВГИ в составе вакцины против 137 БМ, выявляемый в ИФА
4.1.3.2. Изучение в ИФА фракций, полученных при разделении и 139 концентрировании вируса герпеса индеек в системе водорастворимых полимеров
4.1.3.3. Изучение фракционного и морфологического состава бес- 141 клеточного ВГИ (производственные серии сухой вакцины против БМ на основе штамма ГС-126)
* 4.2. РАЗРАБОТКА МЕТОДА СТАБИЛИЗАЦИИ ВГИ В ВАК
ЦИНЕ
4.2.1. Влияние метода стабилизации на сохранность активности
ВГИ в сухой вакцине
4.2.2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ СУХОЙ ВАКЦИНЫ
ПРОТИВ БМ ИЗ РАЗНЫХ ВАРИАНТОВ ШТАММА ГС126 МЕТОДОМ ИФА
4.2.3. ОЦЕНКА КАЧЕСТВА НАТИВНОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ
ф БМ МЕТОДОМ ИФА
4.3. ДЕТЕКЦИЯ АНТИГЕНЫХ ДЕТЕРМИНАНТ РАЗЛИЧ
НЫХ СЕРОТИПОВ ВБМ И АНТИТЕЛ К НИМ МЕТОДОМ БЛОКИРОВАНИЯ ИФА
4.4. ВЫДЕЛЕНИЕ АПАТОГЕННЫХ ШТАММОВ ВГК И
ИЗУЧЕНИЕ В ИФА ИХ ПРОТЕКТИВНЫХ СВОЙСТВ
4.4.1. Исследование сывороток на наличие антител к ВБМ, ВГК
и ВГИ в птицехозяйствах с высоким уровнем заболеваемо-
^ сти БМ
4.4.2. Исследования сывороток крови на наличие антител к ВГИ,
ВГК и ВБМ в птицехозяйствах с низким уровнем заболеваемости БМ
4.4.3. Разработка методов выделения и поддержания апатоген
ных вариантов ВГК
4.4.4. ИФА для детекции ВГК
4.4.5. Изучение взаимовлияния различных штаммов ВБМ при
ф применении би- и поливалентных вакцин против БМ
4.4.5.1. Изучение явления протективного синергизма отечествен
ных штаммов ВГК
4.4.5.2. Испытания иммуногенных свойств поливалентной вакци
Vitter и др. [446] и Качуатига и др. [279] при исследовании индеек как возможного промежуточного хозяина и резервуара ВБМ в природе. Помимо США ВГИ был выделен во многих странах мира, в том числе - штамм М24/72 в нашей стране [53]. Изоляту ВГИ, выделенному Vitter и др. и обозначенному как ГС-126, отдают предпочтение во всем мире при изготовлении вакцины против БМ [302, 304, 320, 424], так как вирус не требует аттенуации, менее опасен в плане реверсии и подвергается стабилизации во внеклеточном состоянии.
ВГИ является клеточно-ассоциированным вирусом, тесно связанным с клетками и ее структурными компонентами. В ассоциированной с клеткой форме вирусы могут длительно сохранять свою инфекционность при условии поддержания жизнеспособности клеток [177].
Замороженные инфицированные клетки используют в качестве, так называемой клеточно-ассоциированной вакцины против БМ [451]. Для лабораторного и промышленного культивирования ВГИ обычно используют первичные культуры клеток куриных, утиных или перепелиных эмбрионов (ККПЭ). Была отработана промышленная технология выращивания ВГИ роллерным методом в ККПЭ и в КККЭ [56].
Вследствие тесной связи с клетками, ВГИ при размножении в культуре клеток спонтанно в культуральную среду не выделяется или выходит из клеток в незначительном количестве. Для получения внеклеточного вируса, инфицированные клеточные культуры диспергируют трипсином, суспензию клеток обрабатывают ультразвуком и лиофильно высушивают [92].
Более высокого выхода ВГИ удается достичь путем экстракции вируса в специальные защитные среды, такие как сахарозо-альбуминовая среда (СФГА). Титр ВГИ при этом в 30-50 раз выше, чем вируса, выделенного в фосфатносолевой буферный раствор (ФСБ) и составляет 1,5x106 - 4,0х106 ФОЕ/мл [92].
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления

Рекомендуемые диссертации данного раздела