Прооксидантно-антиоксидантное равновесие у растений при воздействии гипертермии и экзогенных фитогормонов

  • Автор:
  • Специальность ВАК РФ: 03.00.12
  • Научная степень: Кандидатская
  • Год защиты: 2002
  • Место защиты: Нижний Новгород
  • Количество страниц: 163 с. : ил
  • Стоимость: 230 руб.
Титульный лист Прооксидантно-антиоксидантное равновесие у растений при воздействии гипертермии и экзогенных фитогормонов
Оглавление Прооксидантно-антиоксидантное равновесие у растений при воздействии гипертермии и экзогенных фитогормонов
Содержание Прооксидантно-антиоксидантное равновесие у растений при воздействии гипертермии и экзогенных фитогормонов
ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
Введение
1. Обзор литературы
1Л. Современные представления о стрессе и его особенности
у растений
1.2. Перекисный гомеостаз растений
1.2. Роль и механизмы участия фитогормонов в развитии
стресса
2. Объект и методы исследований
2.1. Объект исследований и постановка опытов
2.1. Методы анализов
2.2.1. Получение общеклеточной фракции ферментов
2.2.2. Определение диеновых конъюгатов
2.2.3. Определение гидроперекисей
2.2.4. Определение активности супероксиддисмутазы
2.2.5. Спектрофометрическое определение активности каталазы
2.2.6. Определение активности глутатионредуктазы
2.2.7. Спектрофометрическое определение активности глутатионтрансферазы
2.2.8. Определение содержания белка
2.2.9. Выделение, суммарной РНК из листьев гороха
2.2.10. Электрофорез и иммобилизация РНК
2.2.11. Амплификация и выделение рекомбинантной
плазмидной ДНК
2.2.12. Рестрикция и электрофорез плазмидной ДНК
2.2.13. Нозерн-блот-гибридизация
2.2.14. Статистическая обработка данных
3. Результаты и их обсуждение
3.1. Состояние прооксидантно-антиоксидантного равновесия в клетках листьев гороха при воздействии на растения теплового шока
3.2. Влияние экзогенных фитогормонов (ИУК и АБК) на перекисный гомеостаз листьев гороха
3.3. Изменение состояния прооксидантно-антиоксидантной системы при совместном действии теплового шока и экзогенных ИУК и АБК
3.4. Влияние теплового шока и фитогормонов на экспрессию генов супероксиддисмутазы и глутатионтрансферазы
Заключение
Выводы
Список цитированной литературы
Приложение
СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АБК — абсцизовая кислота
АО - антиоксидантные (ферменты, система защиты и т.д.)
АФК - активные формы кислорода
ГП - гидроперекиси
ГР - глутатионредуктаза
ГТ - глутатионтрансфераза
ГТЦ - гуанидинтиоцианат
ДК - диеновые конъюгаты
ИУК - индолил-3-уксусная кислота
кДНК - комплементарная ДНК
НСТ - нитросиний тетразолий
ПОЛ - перекисное окисление липидов
ПОЛ о АО - прооксидантно-антиоксидантное равновесие
СОД - супероксидцисмутаза
ТХУ - трихлоруксусная кислота
ТІТТ - тепловой шок
ФМС - феназинметасульфат
а-32Р-дАТФ — дезоксиаденозинтрифосфат, содержащий в а-фосфорном остатке изотоп 32Р С8Н - восстановленная форма глутатиона вО - окисленная форма глутатиона 8ПБ - додецилсульфат натрия

1999). Каталаза инактивируется под действием света, супероксидным анион-радикалом, N0 и пероксинитритом (Corpas е.а., 2001), салициловой кислотой, которая связывается с активным центром каталазы, выступая в роли конкурентного ингибитора (Тарчевский и др., 1999), и CIST (Самуилов и др., 2000).
Ферментами, разлагающими Н202, также являются пероксидазы (КФ
1.11.1.7.) - гемсодержащие белки, катализирующие окисление широкого ряда электронодонорных субстратов пероксидом водорода (Газарян и др., 1998). Растения обычно содержат много изоферментов пероксидаз с неспецифической активностью. В качестве электронодонорных субстратов чаще используются фенольные или индольные соединения (Весапа е.а., 1998).
Помимо пероксидаз и каталаз для растений характерна мощная система защиты от пероксида водорода - так называемый аскорбат-глутатионовый цикл, включающий в себя ферменты аскорбатпероксидазу, дегидроаскорбат-редуктазу, монодегидроаскорбатредуктазу и глутатионредуктазу. Во время работы цикла происходит восстановление Н202 в присутствии НАДН или НАДФН (Иванов, 1998, Весапа е.а., 1998, Asada, 1999). Аскорбат-глутатионовый цикл функционирует главным образом в хлоропластах, кроме того в цитозоле (Chemikova е.а., 2000), пероксисомах (Jimenez е.а., 1998; Corpas е.а., 2001), митохондриях (Весапа е.а., 1998).
Основным ферментом цикла является аскорбатпероксидаза (КФ 1.11.1.11., Мг 28-58 кДа), содержащая гемовое железо (Весапа е.а., 1998). Обнаружено порядка семи изоформ фермента (Ye е.а., 2000). В хлоропластах выделены стромальная и связанная с тилакоидной мембраной аскорбатпероксидаза. Тилакоидная форма локализована преимущественно вблизи акцепторной части ФСІ, что обеспечивает перехват молекул Н202 вблизи места их образования (Застрнжная и др., 1997, Иванов, 1998).
T.Chemikova е.а. (2000) лимитирующим ферментом цикла считают глутатионредуктазу (КФ 1.6.4.2.), восстанавливающую окисленный глутатион:
GSSG + ГР-НАДФН2 -»2GSH + ГР-НАДФ+.

Рекомендуемые диссертации данного раздела