Антикоагулянтная протеиназа (активатор протеина С) микромицета Aspergillus ochraceus: получение и свойства

  • автор:
  • специальность ВАК РФ: 03.02.03, 03.01.06
  • научная степень: Кандидатская
  • год, место защиты: 2013, Москва
  • количество страниц: 141 с. : ил.
  • бесплатно скачать автореферат
  • стоимость: 240,00 руб.
  • нашли дешевле: сделаем скидку
  • формат: PDF
pdf

действует скидка от количества
2 диссертации по 223 руб.
3, 4 диссертации по 216 руб.
5, 6 диссертаций по 204 руб.
7 и более диссертаций по 192 руб.
Титульный лист Антикоагулянтная протеиназа (активатор протеина С) микромицета Aspergillus ochraceus: получение и свойства
Оглавление Антикоагулянтная протеиназа (активатор протеина С) микромицета Aspergillus ochraceus: получение и свойства
Содержание Антикоагулянтная протеиназа (активатор протеина С) микромицета Aspergillus ochraceus: получение и свойства
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления
СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л .Современные представления о действии протеиназ системы гемостаза
1.1.1. Свертывание крови и фибринолиз
1.1.2. Антикоагулянтные механизмы системы гемостаза
1.2. Физиологические функции системы протеина С
1.2.1. Структурные особенности и активация протеина С
1.2.2. Антикоагулянтный эффект активированного протеина С
1.2.3. Цитопротекторный эффект активированного протеина С
1.3. Активаторы протеина С из яда щитомордников
1.4. Рекомбинантный активатор протеина С из ПсЫа раяЮгчз
1.5. Внеклеточные протеиназы мицелиальных грибов и регуляция их секреции
1.6. Воздействие внеклеточных протеиназ микромицетов на систему гемостаза
1.6.1. Микромицеты - продуценты протеиназ, оказывающих воздействие на фибринолитическую систему
1.6.2. Микромицеты - продуценты протеиназ, оказывающих воздействие на коагулянтную и антикоагулянтную системы.
1.7. Образование микромицетами ферментов в условиях твердофазного культивирования
1.7.1. Характеристика ТФК и физиологические особенности роста мицелиальных грибов в условиях ТФК
1.7.2. Образование ферментов мицелиальными грибами в условиях ТФК
1.8. Заключение
ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2Л. Объекты исследования
2.2. Методы и условия культивирования продуцентов
2.2.1. Глубинное культивирование
2.2.2. Твердофазное культивирование
2.3. Молекулярно-генетические методы
2.3.1. Выделение ДНК из мицелия грибов
2.3.2. ПНР и секвенирование
2.4. Определения концентрации белка
2.5. Методы определения протеолитической активности
2.5.1. Определение общей протеолитической активности
2.5.2. Определение активаторной к протеину С активности
2.5.3. Определение амидолитической активности с хромогенными пептидными субстратами
2.5.4. Определение фибринолитической и активаторной к плазминогену активности
2.5.5. Определение коллагенолитической активности
2.6. Получение препаратов внеклеточных белков
2.7. Электрофоретические методы
2.7.1. Изоэлектрофокусирование
2.7.2. Нативный электрофорез белков в полиакриламидном геле
2.7.3. Денатурирующий электрофорез белков в полиакриламидном геле
2.8. Определение способности протеиназы А. оскгасет к активации протеина С
2.9. Определение наличия углеводного компонента протеиназы
2.10. Определение кинетических параметров протеиназы
2.11. Проведение ингибиторного анализа
2.12. Определение рН-оптимума действия и рН-стабильности протеиназы

2.13. Определение температурного оптимума активности и термостабильности протеиназы
2.14. МАЛДИ-масс-спектрометрия протеиназы
2.15. Проведение сравнения активаторной к протеину С активности
протеиназ из А. оскгасеш и яда змеи щитомордника
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Сравнение молекулярно-генетических свойств штаммов Л. оскгасеш
3.2. Выявление способности внеклеточных протеиназ штаммов микромицета А. оскгасеш к проявлению активаторной к протеину С активности
3.3. Динамика накопления протеолитических ферментов с активаторной к протеину С, тромбиноподобной и плазминоподобной активностью микромицетами А. оскгасеш
3.4. Влияние условий культивирования на образование протеиназ -активаторов протеина С культурой А. оскгасеш Ь-
3.5. Образование протеиназ - активаторов протеина С культурой
А. оскгасеш Ь-1 в условиях твердофазного культивирования
3.6. Получение и разделение препаратов внеклеточных белков штамма А. оскгасеш Ь-1, выращенного в условиях глубинного и твердофазного культивирования
3.7. Изучение свойств протеиназы - активатора протеина С плазмы крови, образуемой А. оскгасеш Ь-
3.7.1. Активация протеина С плазмы крови человека внеклеточной протеиназой А. оскгасеш Ь-
3.7.2. Субстратная специфичность протеиназы - активатора протеина С, секретируемой А. оскгасеш Ь-
3.7.3. Изучение кинетических параметров протеиназы
А. оскгасеш Ь-1 с активаторной к протеину С активностью
3.7.4. Влияние ингибиторов протеолитических ферментов на активаторную к протеину С активность внеклеточной протеиназы
А. оскгасеш Ь-

включавшее скрининг 116 культур микроскопических грибов, принадлежащих к разным систематическим группам и выделенных из различных экотопов (разных типов почв, растительных остатков, корневой зоны растений, разрушающихся камней). В результате было установлено, что наиболее широко у грибов распространена общая протеолитическая активность, которая была зарегистрирована у 66% культур Фибринолитическая активность обнаружена у 56% штаммов при проверке на фибрине человека и у 65% штаммов при проверке на фибрине крови быка. Активность по типу активаторов плазминогена отмечена для 20 и 30% испытанных штаммов микроскопических грибов при определении на фибрине крови человека и быка, соответственно. У 25% штаммов изученных культур была установлена антикоагулянтная активность по типу активаторов протеина С (Ландау и др., 1998). Полученные данные могут свидетельствовать, что специфичность протеиназ к белкам крови животных (быка) встречается у микромицетов чаще, чем к белкам крови человека.
Исследования последних лет показали, что такая широкая распространенность способности к образованию протеолитических ферментов мицелиальными грибами с подобной специфичностью связана не только с необходимостью гидролизовать природные белковые субстраты, но и с их участием в патогенезе как человека, так и растений (Павлюкова и др., 1998).
1.6.1. Микромицеты - продуценты протеиназ, оказывающих воздействие на фибринолитическую систему
К этой группе относятся протеолитические ферменты с фибринолитической, фибриногенолитической и активаторной к плазминогену активностью.

Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления

Рекомендуемые диссертации данного раздела