Получение зародышей крупного рогатого скота вне организма

  • автор:
  • специальность ВАК РФ: 03.00.23
  • научная степень: Докторская
  • год, место защиты: 2002, Боровск
  • количество страниц: 227 с. : ил
  • автореферат: нет
  • стоимость: 240,00 руб.
  • нашли дешевле: сделаем скидку
  • формат: PDF + TXT (текстовый слой)
pdftxt

действует скидка от количества
2 диссертации по 223 руб.
3, 4 диссертации по 216 руб.
5, 6 диссертаций по 204 руб.
7 и более диссертаций по 192 руб.
Титульный лист Получение зародышей крупного рогатого скота вне организма
Оглавление Получение зародышей крупного рогатого скота вне организма
Содержание Получение зародышей крупного рогатого скота вне организма
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления
СОДЕРЖАНИЕ.
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.
2.1. Получение зрелых яйцеклеток крупного рогатого скота.1 о
2.1.1. Дозревание ооцитов крупного рогатого скота i viv.
2А.2. Температурный режим доставки яичников и культивирования ооцитов и ранних
зародышей крупного рогатого скота.
2А.З. Выделение ооцитов из антральных фолликулов яичника
2А.4. Классификация ооцитовМ
2А.5. Дозревание ооцитов крупного рогатого скота i vi.
2.2. Оплодотворение ооцитов крупного рогатого скота i vi.з
2.2А. Капацитация сперматозоидов
2.2.2. Предварительная обработка сперматозоидов замороженного эякулята быка.
2.2.3. Отодотворение ооцитов крупного рогатого скота i vi.
2.3. КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА I VI
2.3.1. Системы культивирования эмбрионов крупного рогатого скота i vi.
2.3.2. Потребность ранних зародышей крупного рогатого скота в энергетических веществах и аминокислотах
2.3.3. Влияние альбумина и сыворотки крови на развитие эмбрионов крупного рогатого скота i vi
2.3.4. Влияние кооперативного взаимодействия ранних эмбрионов крупного рогатого скота на их развитие i vi
2.3.5. Динамика ра звития ранних эмбрионов крупного рогатого скота
2.3.6. Физикохимические условия культивирования эмбрионов крупного рогатого скота i vi
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.
ЗА. Общие условия культивирования.
3.2. Реактивы и среды.
3.3. Получение i viv и трансплантация зародышей крупного рогатого скота и кроликов .
3.4. Получение яичников крупного рогатого скота и выделение ооцитов.
3.5. Дозревание и оплодотворение ооцитов крупного рогатого скота i vi.
3.6. Культивирование эмбрионов крупного рогатого скоти i vi.
3.7. Приготовление эстральпой сыворотки крови крупного рогатого скота для использования в технологии получения зародышей вне организма.
4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.
4.1. ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ФАКТОРОВ ПРИ МАНИПУЛИРОВАНИИ ВО ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ НА ГАМЕТЫ И ЗАРОДЫШИ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА И КРОЛИКОВ, ПОЛУЧЕННЫЕ I VIV.
4АА. Влияние условий кратковременного хранения зародышей крупного рогатого скота на их .жизнеспособность
4.1.2. Тестирование условий культивирования с использованием эмбрионов кролика
4.1.3. Совершенствование методов капацитации сперматозоидов i vi с использованием в качестве модели гамет кролика
4.2. ДОЗРЕВАНИЕ ООЦИТОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА I V
4.2.1. Дозревание ооцитов крупного скота i vi при сокультивировании с тканями стенки фолликула
4.2.2. Эффективность дозревания ооцитов крупного рогатого скоти i vi при размещении различного числа комплексов ооциткумулюс па единицу объема среды.
4.2.3. Влияние среды, источника сыворотки крови и сочетания гормонов в среде на дозревание ооцитов крупного рогатого скота i viI
4.2.4. Перспективы повышения компетенции ооцитов крупного рогатого скота при дозревании i vi. З
4.2.5. Устройство и способ для выделения ооцитов крупного рогатого скота из антральных фолликулов яичника.
4.3. КАПАЦИТАЦИЯ СПЕРМАТОЗОИДОВ И ОПЛОДОТВОРЕНИЕ ООЦИТОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА I VI
4.3.1. Получение, хранение и использование эпидидималызых сперматозоидов быка
4.3.2. Определение влияния концентрации гепарина на капацитацию сперматозоидов энидидимальных и эякулята быка i vi.
4.3.3. Влияние концентрации сперматозоидов в среде на отюдотворение ооцитов, дозревавших при разных условиях.
4.3.4. Влияние разных марок альбумина в среде на результаты оплодотворения ооцитов крупного скота i vi.
4.3.5. Влияние семени разных быков и метода подготовки сперматозоидов на результаты оплодотворения ооцитов крупного рогатого скота i vi.
4.4. КУЛЬТИВИРОВАНИЕ ЭМБРИОНОВ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА I VI.
4.4.1. Получение жизнеспособных эмбрионов крупного рогатого скота i vi при использовании системы сокулыпивирования па монослое соматических клеток.
4.4.2. Использование простых солевых сред для культивирования эмбрионов крупного рогатого скота i vi
4.4.3. Развитие ранних эмбрионов крупного рогатого скота в среде с разным содержанием сыворотки крови и альбумина.
4.4.4. Влияние аминокислот и различных уровней энергетических веществ в среде на развитие эмбрионов крупного рогатого скотаI
4.4.5. Критерии оценки системы культивирования эмбрионов крупного рогатого скота i vi.
4.4.6. Получение зародышей крупного рогатого скота вне организма для использования в научноисследовательской работе.
4.5. МОДИФИЦИРОВАННЫЕ МЕТОДЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЗАРОДЫШЕЙ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА I VI
4.5.1. Формулы для доведения осмотического давления растворов
4.5.2. Приготовление тотальных препаратов ранних зародышей крупного рогатого скота с использованием камеры, насыщенной парами фиксатора.
4.5.3. Модифицированный метод приготовления цитологических препаратов
нредимшантационных зародышей крупного рогатого скота.
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Введение.
Актуальность


Ооциты категории , безусловно, обладают существенно пониженной способностью к созреванию, и значительная часть их дегенерирует i vi i . Внутриклеточный уровень глутатиона оказывался достоверно выше у ооцитов, дозревавших i vi как комплекс ооциткумулюс по сравнению с денудировапиыми ооцитами. Очень важно предсказать потенциал развития определенного ооцита. Например, для инъекций чужеродной ДНК должны быть отобраны яйцеклетки и зиготы с максимальным потенциалом к эмбриогенезу. Точно также ооциты, отобранные как реципиенты для ядерных пересадок, должны обладать наивысшим потенциалом к развитию. И с этой точки зрения очень интересны работы . Более крупные фолликулы содержат ооциты с более высоким потенциалом к развитию , , v . Ооциты из фолликулов диаметром меньше 2 мм могут обладать меньшей жизнеспособностью , , . Из антральных фолликулов, расположенных в толще коркового слоя яичника, подвергаются i vi дозреванию и последующему развитию до бластоцисты только ооциты с наибольшим диаметром . По количеству фолликулов в яичнике и качеству выделенных ооцитов в связи с возрастом животных результаты были примерно одинаковы по возрастным группам животных телки месяца, коровы лет и 9 лет , , . Сообщалось, что созревание ооцитов из яичников с функционирующим или регрессирующим желтым телом шло примерно одинаково, поэтому отбор ооцитов с учетом стадии цикла представлялся не нужным ii, i, ii . Однако в экспериментах v . Д астрального цикла . Д . Д 6. Д2 . Кроме того, эмбрионы развивались быстрее, если ооциты выделялись из яичников, взятых в конце лютеалыюй фазы на Д. Авторы полагают, что стадия эстралыюго цикла может влиять на потенциал развития ооцитов и получение эмбрионов i vi. Гузеватый и др. Результаты работы i . По данным . Имеется предположение, что способность ооцитов к дозреванию это одна из последних функций, утрачиваемых фолликулом в процессе атрезии , , . Более того, наивысшей компетенцией развития могут обладать ооциты с несколько менее компактным кумулюсом, которые происходят из здоровых или незначительно атретических фолликулов. По данным i, i компетентные ооциты могут происходить из фолликулов с ранними признаками атрезии, тогда как многие здоровые фолликулы содержат некомпетентные к эмбриональному развитию ооциты. Степень дифференциации фолликула более важна, чем его величина или состояние здоровья i . В целом, отбор ооцитов для дозревания i vi в основном базируется на качестве цитоплазмы и клеточного окружения. Более высокое качество кеточного окружения связывается с более высоким уровнем дозревания ii, i, i . Дозревание ооцитов крупного рогатого скота i vi. Возобновление мейоза и ядерное дозревание ооцитов млекопитающих i vi вызывается спонтанно, когда ооциты высвобождаются из ингибирующею окружения фолликула и переносятся в соответствующую культуральную среду i, , v, . Сроки дозревания ооцитов крупного рогатого скота i viv от пика ЛГ и i vi от начала культивирования сопоставимы. Стадия метафаза II выявляется через часов от начала дозревания ооцитов i vi i . Максимальное количество ооцитов на стадии МИ выявляется через часа культивирования i . Лагутина и др. X . Хорошо установлено, что условия дозревания ооцитов крупного рогатого скота i vi оказывают существенное влияние на дробление зигот и последующее развитие зародышей, во всяком случае до бластоцисты iii . В эксперименте , vi из 5 испытуемых сред, использованных для дозревания ооцитов крупного рогатого скота, лучшими были МЕМа и . Среда 9 занимала среднее положение. Среды и оказались неподходящими для дозревания ооцитов крупного рогатою скота i vi. Ранее также было сообщение, что среда оказалась совсем непригодной для дозревания ооцитов крупного рогатого скота, хотя она была лзчшей для дозревания ооцитов мыши V . Очень низкий выход расширенных бластоцист отмечен в случае дозревания ооцитов в среде В2 7, тогда как при дозревании ооцитов в среде 9 и до стадии расширенной бластоцисты развивалось и ооцитов, соответственно , , . Среда I0 и ранее успешно использовалась в качестве среды дозревания ооцитов крупного рогатого скота X .
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления

Рекомендуемые диссертации данного раздела