Разработка тест-систем для диагностики герпесвирусной инфекции кошек на основе иммунологических методов

  • автор:
  • специальность ВАК РФ: 03.00.23, 16.00.03
  • научная степень: Кандидатская
  • год, место защиты: 2007, Щёлково
  • количество страниц: 153 с. : ил.
  • бесплатно скачать автореферат
  • стоимость: 240,00 руб.
  • нашли дешевле: сделаем скидку
  • формат: PDF + TXT (текстовый слой)
pdftxt

действует скидка от количества
2 диссертации по 223 руб.
3, 4 диссертации по 216 руб.
5, 6 диссертаций по 204 руб.
7 и более диссертаций по 192 руб.
Титульный лист Разработка тест-систем для диагностики герпесвирусной инфекции кошек на основе иммунологических методов
Оглавление Разработка тест-систем для диагностики герпесвирусной инфекции кошек на основе иммунологических методов
Содержание Разработка тест-систем для диагностики герпесвирусной инфекции кошек на основе иммунологических методов
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления


Идеальным условием получения моноспецифических антисывороток представляется иммунизация продуцентов чистыми антигенами. Ключевым моментом в отработке твердофазного непрямого ИФА является получение коньюгата, то есть иммуноглобулина меченого пероксидазой. Качество получаемого коньюгата находится в прямой зависимости от серологической активности иммуноглобулина, активности фермента и условий связывания этих компонентов. Реакция иммунофлуоресценции, была предложена Кунсом в году, и ее трудно отнести к новым методам исследования. Однако, эта реакция получила в настоящее время вторую жизнь благодаря появлению гибридомных технологий, позволяющих получать моноклональные антитела. Их применение позволило значительно увеличить ее чувствительность и специфичность. Популярность РИФ объясняется экономичностью, наличием широкого спектра диагностических наборов, быстротой получения ответа. Чаще всего РИФ используют для быстрого обнаружения возбудителя в патологическом материале. РИФ является чрезвычайно ценным методом диагностики, его можно по праву отнести к экспрессметодам, поскольку он позволяет получить результат в течение ,5 часов с момента взятия образца на анализ, прост в исполнении, не требует стерильной работы. Таким образом, существуют все предпосылки для расширения спектра методов диагностики герпесвирусной инфекции кошек, поскольку быстрый и точный диагноз является решающим условием организации необходимых мер борьбы с этим заболеванием. В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы являлось создание диагностикумов на основе очищенного и концентрированного вируса ГВК1, штамм Гранд, для использования его в качестве компонента наборов при определении уровня антител и детекции антигенов вируса ГВК1 в различных биологических субстанциях при иммуноферментной и люминисцентной диагностике герпесвирусной инфекции кошек. Разработать метод получения очищенного и концентрированного вируса ГВК1, штамм Гранд, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток . Получить иммуносорбенты на основе активированной Сефарозы 4В с иммобилизованным в качестве анигена очищенным и конценгрированным вирусом ГВК1. Выделить антитела к вирусу ГВК1 из сыворотки естественно переболевших кошек методом аффинной хроматографии и получить пероксидазный и ФИТЦконъюгаты антител к антигенам ГВК1. Выделить I кошки, получить аитисыворогку к I кошки на кроликах и получить пероксидазный и ФИТЦконьюгаты с антиI кошки. Разработать тест систему для определения уровня антител к вирусу ГВК1 в сыворотке крови кошек в непрямм твердофазнм ИФА. Разработать тест систему для детекции антигена ГВК1 в смывах и соскобах с окулярного и респираторного тракта в прямом и непрямом твердофазном ИФА. Разработать тест систему для определения антигенов вируса ГВК1 в смывах и соскобах с окулярного и респираторного тракта в непрямой и прямой РИФ. Провести сравнительную оценку эффективности детекции вируса в прямой и непрямой РИФ, прямом и непрямом твердофазном ИФА и методом вирусовыделения на культуре клеток. ГВК1 в сыворотке крови кошек в непрямом твердофазном ИФА и реакции нейтрализации и детекции вируса в прямой и непрямой РИФ, прямом и непрямом твердофазном ИФА и методом вирусовыделения на культуре клеток. Разработаны методики получения компонентов для иммуноферментных и люминесцентных тестсистем, предназначенных для диагностики герпесвирусной инфекции кошек. Разработанные методики определения уровня антител в РИФ и ИФА рекомендуется использовать для оценки напряженности иммунитета, определения материнских антител у котят с целью корректировки сроков первой вакцинации, а также в качестве методов контроля антигенной активности соответствующих моно и поливалентных вакцин. Полученные результаты являются основой для дальнейших исследований по изучению механизмов и закономерностей формирования постинфекционного и поствакцинального противовирусного иммунитета у кошек, а также дают возможность расширить научные знания относительно роли вирусов в возникновении массовых респираторных заболеваний кошек и могут быть использованы при дальнейшем изучении иммунологии и патогенеза инфекций, вызванных герпесвирусами.
Вы всегда можете написать нам и мы предоставим оригиналы страниц диссертации для ознакомления

Рекомендуемые диссертации данного раздела