Анионные полимеры клеточных стенок фитопатогенных стрептомицетов

Содержание
Введение 
Глава 1. Обзор литературы 
1. Структура тейхоевых и генхуроновых кислот 
1.1. Тейхоевые кислоты 
1.1.1. Полиполиолфосфаты 
1.1.1.1. Полиглнцерофосфаты 
1.1.1.2. Полирибитфосфаты 
1.1.1.3. Полиэритритфосфаты и полиманнитфосфаты 
1.1.1.4. Полиарабитфосфааы 
1.1.2.олиглнкозилполиолфосфаты 
1.1.2.1. Полигликозилглицсрофосфаты 
1.1.2.2. Полигликозилрибитфосфаты 
1.1.3. Полиполиол фосфатгликозил фосфаты 
1.1.4. Полиполиол фосфаггликозилполиол фосфаты смешанной структуры
1.2. Структура тейхуроновых кислот 
1.3. Локализация и функции анионных полимеров 
2. Видовая специфичность тейхоевых кислот 
2.1. Тейхоевые кислоты клеточных стенок видов
рода ЫосагсИорш 
2.2. Тейхоевые кислоты клеточных стенок видов
рода С1усотусез 
2.3. Тейхоевые кислоты клеточных стенок видов
рода осагсЫез 
2.4. Тейхоевые кислоты клеточных стенок видов
рода ЛсИпопшс1ыго 
2.5. Тейхоевые кислоты клеточных стенок видов
рода Лотусез 
2.6. Тейхоевые кислоты клеточных стенок видов
рода 1ер1отусез 
3. Сиаловыс кислоты 
3.1. Эукариотическая клетка 
3.2. Прокариотическая клетка 
4. Фитопатогены картофеля
Глава 2. Объекты и методы исследований 
1. Объекты исследовании 
2. Методы исследований 
2.1. Получение препаратов клеточных стенок 
2.2. Получение пептидогликана 
2.3. Выделение углеводсодержащих полимеров 
2.4. Хроматография на бумаге и электрофорез 
2.5. Аналитические методы 
2.6. Методы определения первичной
структуры тейхоевых кислот 
2.6.1. Кислотный гидролиз 
2.6.2. Щелочной гидролиз 
2.6.3. гидролиз 
2.6.4. Определение Оацильных групп 
2.6.4.1. Гидроксиламинолиз 
2.6.4.2. Аммонолиз 
2.6.5. ЯМР спектроскопия 
3. Обоснование использования методов 
Глава 3. Результаты исследований и их обсуждение 
1. Результаты исследований 
1.1.  . ВКМ Ас 
и  . ВКМ Ас2
1.2.  i ВКМ Ас4 
1.3.  i ВКМ Ас4.
 . ВКМ Ас
и  i ВКМ 6 
1.4.  . ВКМ  
1.5.  .  1, ,  
1.6.  .   
1.7.  i  
и  .   
1.8.  i   
2. Обсуждение результатов 
Выводы 
Список литерату


Полученные результаты могут служить основой для будущих исследований процесса патогенеза и позволят в дальнейшем разработать способы предотпращепия адгезии, решив, таким образом, ряд экологических проблем в том числе проблему устранения факторов патогенности. Кроме  необычным было обнаружение в клеточной стенке одного из стрептомицетов полимера, присущего эукариотическим клеткам  галактоманнана нейтрального полисахарида. Аналогичное соединение, но иной структуры, было найдено до наших исследований лишь в эукариотах   . Кроме вышеперечисленных соединений нами также были найдены две тейхуроновые кислоты ранее не описанной структуры и еще один нейтральный полисахарид, содержащий ЗЫацетилгалактозамин. Исследованные стрептомицсты относятся к различным группам, и полученные данные по структурам тейхоевых и тейхуроновых кислот подтвердили еще раз видоспецнфнчность этих анионных полимеров у актиномицегов. Хочу выразить благодарность за помощь в поставленных исследованиях всему коллективу лаборатории Биологически активных веществ, научному руководителю, д. Наумовой Ирине Борисовне, к. Стрешинской Галине Матвеевне, сотрудникам ВКМ АН г. Пущино во главе с к. Евтушенко Людмилой Ивановной, коллективу Инта органической химии им. Зелинского, в особенности д. Шашкову Александру Степановичу, который провел ЯМР спектхскопические исследования и интерпретировал полученные спектры, сотрудникам Белорусского инта картофелеводства, рецензенту Татариновой Н. Ю., оппонентам д. Г.М. Зеновой и д. М.С. Крицкому. Глава 1. Обзор литературы. Структура тейхоевых и тейхуроновых кислот. Тейхоевые и тейхуроновые кислоты  это анионные полимеры клеточных стенок бактерий, объединенные ковалентными связями через связующий олигомер с пептидогликаном  основным структурным полимером стенки. Анионные полимеры составляют от до  от веса клеточной стенки, имеют разнообразную структуру. Современные зкеиернментальные данные позволяют разделить их на три большие группы тейхоевые. Тейхоевые кислоты. Тейхоевые кислоты были найдены впервые в году руппой английских ученых под руководством проф. Бэддили в клетках лактобацилл, бацилл и стафилококков Наумова и Шашков, . Позже они были обнаружены у представителей многих других групп грамноложительных бактерий пневмококков, листерий, клостридий, многих актнномицетов и родственных им организмов. Тейхоевые кислоты всегда содержат полиолфосфаты, фосфоди эфирные группы и часто гликозильные и Оацильные заместители. III основная цепь кроме полнолфосфатов содержит гликозил1фосфатные остатки и IV чсредющиеся звенья тейхоевых кислот I и И. Р1усо5у1ро Р Оаиильными остатками. Встречаются также цепи и без гликозильных и ацильных заместителей. Полимеры этого типа содержат в качестве полиола глицерин, рибит, маннит, эритрит или арабигг, в связи с чем их можно разделить на 4 подтипа. Полиполиолфосфаты. Это наиболее распространенные структуры. Они представлены 1,3полиглицерофосфатными и 2,3полиглицерофосфатными полимерами. В 1,3полиглииерофосфатах фосфодиэфирные сняли объединяют С1 и С3 глицериновых остатков подтип 10 1,3. С2 и С3 остатков подтип 10 2,3. В них чаше всего встречаются в качестве гликозильных заместителей глюкоза, галактоза и Маиетилированный аминосахар, локализованные но С2 или С1 глицерина соответственно. Также встречаются ООаланильные, ОЬлизильные или Оацсгильныо остатки. Например, в клеточной стенке ii па Рис. Фрагмент 1,3полиглицсрофосфата с 3глюкозой ii i ВКМ Ас2Т. Найдены структуры 1,5 и 3,5по. ТК. Наиболее встречаемые 1,5связаные цепи, обнаруженные в клеточных стенках многих грамположитсльных бактерий v  . ЗОмегилрамноза и ацети лированные амнносахара, рибитфосфатные и глинерофосфатные боковые звенья, 0лизильные, аланильные и Осукцинильные остатки и пируваткетальные фуппы. Например, клеточная стенка ii i ВКМ Ас содержит около  по весу 1,5полирибитфосфатных цепей, имеющих боковые глинерофосфатные олигомеры при ОН3 некоторых остатков рибита Стрешинская и др. Рис. Незамещенный 3,5полирибитфосфат был найден недавно в ii  ВКМ Ас v . ii ВКМ  Тульская и др. Рис.