Разделение и определение витаминов групп A, E, K и D методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии

СОДЕРЖАНИЕ
Список сокращений и обозначений 
Введение 
1. Литературный обзор 
1.1. Общая характеристика жирорастворимых витаминов 
1.2. Методы аналитического определения витаминов групп А, О, Е и К 
1.2.1. Химические и биологические методы 
1.2.2. Оптические методы 
1.2.3. Электрохимические методы 
1.2.4. Хроматографические методы 
2. Основные факторы, влияющие на разделение в обращенно
фазовой жидкостной хроматографии 
2.1 Неподвижные фазы и адсорбция сорбатов 
2.2. Подвижные фазы и их селективность 
2.3. Закономерности и модели удерживания в ОФ ВЭЖХ 
2.4. Методы оптимизации эксперимента 
2.5. Задачи и этапы исследования 
3. Экспериментальная часть 
3.1. Объекты и методы исследования 
3.2. Растворители и реактивы 
3.3. Приборы и оборудование 
3.4. Приготовление хроматографических колонок 
3.5. Расчет параметров хроматографического разделения 
4. Закономерности разделения жирорастворимых витаминов
при элюировании бинарными водноорганическими элюентами 
4.1. Структура и гидрофобность сорбатов 
4.2. Применение универсальной квазихимической модели удерживания ЖРВ при элюировании водноорганическими смесями 
4.3. Разделение на химически модифицированных сорбентах 
4.4. Разделение на кремнеземах с привитыми алкильными группами 
5. Многопараметрическая оптимизация состава
трехкомпонентной подвижной фазы 
5.1. Выбор композиционных факторов и параметров оптимизации 
5.2. Ограничение области факторного пространства на
главном концентрационном треугольнике составсвойство 
5.3. Математическое планирование проведения эксперимента, расчет уравнений регрессий, проверка адекватности полученных уравнений, решение задач максимина и совместное решение системы неравенств
5.4. Экспериментальная проверка математического прогнозирования качества разделения смеси сорбатов
5.5. Схема выбора сорбента и элюента для разделения ЖРВ
6. Определение витаминов в лекарственных смесях,
фармацевтических и ветеринарных препаратах
6.1. Характеристики селективности и эффективности разделения витаминов на сорбентах различной природы
6.2. Определение предела обнаружения и параметров уравнений регрессии
6.3. Определение витаминов в препаратах с водорастворимой основой
Литература


Москва,  Международном Симпозиуме по разделениям в ВЭЖХ , Испания, Гранада,  на VI конференции Аналитика Сибири и Дальнего Востока Новосибирск,  Международном форуме Аналитика и аналитики Воронеж,  Научнотехнической конференции по хроматографии Иониты Воронеж, . Публикации. По теме диссертационной работы опубликовано печатных работ, из них 5 статей в Журнале аналитической химии, Заводская лаборатория. Диагностика материалов, i , 7 статей в сборниках статей и трудов конференций тезисов докладов. Наиболее значимые публикации представлены в списке опубликованных работ. Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы и характеристики метода, четырех разделов экспериментальной и расчетной части, выводов, списка цитируемой литературы и приложений. Работа изложена на 9 страницах, содержит рисунков и таблиц. Список литературы включает 6 наименований, в том числе иностранных источников. Витамины  низкомолекулярные биологически активные органические соединения разнообразной химической природы и сложной структуры. Е, фенилхроманолы витамины группы Р, пиридинкарбоновые витамин РР, о кси метил пи ридины витамин Вб, птериновые группа фолиевой кислоты Вс, пиримидинотиазоловые витамин В, изоаллоксазинолы группа витамина В2, кобаламины группа витамина В. Витамины делят на растворимые в воде и растворимые в жирах. Водорастворимые витамины  это в основном коферменты, участвующие в обмене веществ например, коферменты клеточного дыхания. Эти витамины С, В, В2, Вс, РР легко выводятся через почки, поэтому их избыточное содержание в рационе человека и животных не столь опасно 1. Жирорастворимых витаминов меньше А, Э, Е, К, ркаротин, и их функции менее изучены. Вследствие нерастворимости в воде они выводятся через почки только после воздействия ферментов. В результате при потреблении в количествах, превышающих необходимые, концентрация жирорастворимых витаминов в организме достигает токсического уровня, вызывая гипервитаминоз 1. Рассматриваемые в данной работе жирорастворимые витамины ЖРВ относятся к соединениям ал и циклического ряда А, Э, 3каротин, ароматического ряда Кз, гетероциклического ряда Е. В табл. К ретинолам витаминам группы А относятся соединения с углеродными атомами в их структуре три метил циклогексеновое кольцо связано с тетраеновой сопряженной цепью изопреноидного типа, оканчивающейся спиртовой или альдегидной группой. Витамин А  это ненасыщенный спирт эмпирической формулы СНО, с пятью двойными связями  одной в РИОНОНОВОМ кольце и четырьмя в боковой алифатической цепи 1. Витамины группы А растворимы в жирах и во многих органических растворителях, но не растворимы в воде. Ретинолы легко подвергаются окислению кислородом воздуха, чувствительны к воздействию света и тепла, образуют простые и сложные эфиры, многие из которых стабильнее витамина А, а также участвуют в биохимических процессах в спиртовой, альдегидной и эфирной формах. В организме человека за счет процессов метаболизма витамин А может быть получен из каротиноидов их называют провитамином А. Провитаминная активность структурных изомеров а, р и укаротинов связана с наличием в их молекуле риононовых колец. Наиболее распространен ркаротин, молекула которого состоит из двух риононовых колец, соединенных алифатической цепью с девятью двойными связями, по одной в каждом кольце. При таком же строении алифатической цепи акарогин содержит один р и один аиононовый циклы. В молекуле укарогина  ненасыщенных двойных связей, один риононовый цикл, и на другом конце молекулы  раскрытое кольцо ионона псевдоионон с одной дополнительной двойной связью. Таблица 1. Обозначения М  молярная масса, гмоль V  температура плавления, С Х1МЛ  длина волны в максимуме поглощения, нм МЕ  международная единица. Ретиииллальмитат Апальмнтат СбНиО ч си. М4. МЕ0,0 мкг Этанол. Рстинил ацетат Ааиетат сно2 С СН,    сна4снсиснчг    СН сн М8. МЕ 0,4 мкг Этанол, ацетон, хлороформ. Ркаротин СиДЬ Н. ИЧХН НСИЧг Н11ИГИ ИгССИ1КХ7 сх  XI М6. МЕ 0. Токоферол Е СНзи к СНСНПЬСНП, ,н нс5у0Асн, СН, 10. МЕ 0. Окончание табл 1. Токоферил ацетаг Еацетат СпНйО Iй МууЧ1 сн, ис 1 1 ксиснгСНгнсм. Эргокальцнферол О с2но си. Холекальииферол 0. Менадион К сн8о2 ос о М2.