Рекомбинация РНК, катализируемая Q β репликазой

  • Автор:
  • Специальность ВАК РФ: 03.00.03
  • Научная степень: Кандидатская
  • Год защиты: 2001
  • Место защиты: Москва
  • Количество страниц: 187 с. : ил
  • Стоимость: 250 руб.
Титульный лист Рекомбинация РНК, катализируемая Q β репликазой
Оглавление Рекомбинация РНК, катализируемая Q β репликазой
Содержание Рекомбинация РНК, катализируемая Q β репликазой


Однако прямые экспериментальные доказательства в пользу как механизма смены матриц, так и других возможных механизмов рекомбинации РНК, отсутствуют. Основной причиной этого мы считаем отсутствие подходящей экспериментальной системы. Мы видим два принципиальных ограничения, присущих всем методам, в которых образование, размножение и выявление рекомбинантных РНК происходят в живой клетке. Это селекция на стадии размножения рекомбинанта выявляются только жизнеспособные и неконтролируемость со стороны экспериментатора процесса образования рекомбинантов. Клетка слишком сложный объект В живой клетке крайне трудно выявить тот конкретный процесс, в результате которого образовалась данная рекомбинантная РНК параллельно с ним происходит множество других реакций. РНК. В методе молекулярных колоний, использованном в данной работе, для размножения рекомбинантных РНК применяется 3 репликаза РНКзависимая РНКполимераза бактериофага РНК, способные эффективно размножаться реплицироваться репликазой, образуются в нашей системе в результате рекомбинации между двумя РНКпредшественниками, каждый из которых сам по себе к репликации не способен. РНК. В частности, представлялось интересным проверить
способность репликазы осуществлять рекомбинацию путм смены матриц. I . Института белка РАН. Е. В. Четвериной, В. И. Угаровым, Т. А. Б. Четвериным. Особо автор благодарит В. РНК. А. Б. РНКзависимой РНКполимеразой, основная функция которой размножение геномной РНК бактериофага i, , , i, , паразитирующего на клетках . Репликаза состоит из 4 субъединиц , . Да i . I . Да и 7 Да i , . Все четыре субъединицы присутствуют в эквимолярном соотношении и образуют довольно прочный комплекс, сохраняющийся в процессе очистки фермента , , . Лишь небольшая доля молекул оказывается лишенной белка 1, связанного слабее других субъединиц . Г i . Под электронным микроскопом репликаза выглядит как компактный сферический комплекс с размерами x . Молекула состоит из двух неравных субкомплексов каждый из них делится бороздой на две части, которые можно соотнести с субъединицами репликазы. Другие данные i, также подтверждают существование субкомплексов в один из субкомплексов входит 1 с субъединицей, закодированной в фаговом геноме, в другой . Точная роль клеточных субъединиц в функционировании регтиказы неизвестна. РНК. Даже с последней элонгация и терминация не изменены. V л . Очищенная репликаза не способна использовать цепь РНК в качестве матрицы. Синтез РНК на цепи возможен1 Только в присутствии так называемого хозяйского фактора i i, i . Как и белок I, нужен только для инициации синтеза i , . В экспериментах i viv i . РНК для начала синтеза цепи. Да ii Ii, . Это очень термоустойчивый белок он не теряет активности после кипячения в течение часа , . Важным свойством является его способность образовывать прочные комплексы с однонитевой РНК, особенно с полиА i, , i а. У . С двухцепочечной РНК или с ДНК хозяйский фактор не взаимодействует . Е. i Ii, . I . Л. . Под термином экспоненциальное размножение мы понимаем следующее. РНК. РНК и исходная родительская, и только что синтезированная. В результате образуются четыре молекулы РНК, и каждая из них опять может копироваться. После третьего цикла число матриц составит 8, после четвертого и т. РНК. РНК. РНК не удваивается. К специфическим, т. РНК, содержащимися в фаге . Также известны искусственно
выведенные реплицирующиеся РНК , . СССАонВеЬгсЬег, i . Последний адениловый остаток добавляется репликазой нематрично в процессе терминации. Роль 3концевою А неизвестна Показано, что удаление этого остатка у РНК не влияет на репликацию, однако большинство вновь синтезированных на такой матрице молекул опять содержит А на Зконце . Круг неспецифических, нереплицируемых, матриц гораздо более широк. I . Также копируются и синтетические полирибонуклеотиды i i, i . Сообщалось также, что в качестве матрицы может быть использован полидезоксирибонуклеотид ix , . X . Г1i. Геном фага представлен однонитевой РНК длиной нт. Рис. Схема вторичной структуры Ор РНК. Показаны 8 и Мсайты связывания репликазы и ценгтры связывания белков СР, и НР.

Рекомендуемые диссертации данного раздела